《光阻法測(cè)定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》藥典解讀

《光阻法測(cè)定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》藥典解讀

摘要：乳狀注射液中尾部大顆粒的含量對(duì)于其質(zhì)量安全性有重要影響，本文圍繞著中國(guó)藥典《光阻法測(cè)定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》一章節(jié)，以奧法美嘉公司的Accusizer A7000 APS設(shè)備為例，探究了光阻法的工作原理及其測(cè)量規(guī)范要求：粒徑及濃度的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，并對(duì)乳狀注射液中大于5μm的乳粒做了相應(yīng)的規(guī)范要求，為國(guó)內(nèi)脂肪乳的研發(fā)與生產(chǎn)提供參考。

關(guān)鍵詞：光阻法、乳狀注射液、5μm、尾部大顆粒、Accusizer A7000 APS

背景介紹

乳狀注射液又稱脂肪乳注射液，是水包油的分散體系, 外觀呈半透明或不透明的乳狀液體, 為熱力學(xué)不穩(wěn)定體系。其制備工藝一般采用高壓均質(zhì)法或微射流法, 無(wú)論采用哪種制備方法, 脂肪乳的粒徑都無(wú)法得到均一的值, 存在一定粒徑分布范圍。

通常, 在脂肪乳中,當(dāng)油脂的密度低于周圍水媒介密度約10%時(shí), 乳析現(xiàn)象就會(huì)產(chǎn)生。乳析的乳劑只要輕輕攪拌, 乳滴仍能重新分布。但當(dāng)脂滴合并成直徑超過(guò)1μm的大脂滴時(shí), 脂滴的合并便是不可逆的過(guò)程, 脂滴會(huì)逐漸聚集, 1μm脂滴可“生長(zhǎng)”成 5μm
甚至更大的脂滴顆粒, 直至自由脂滴從乳劑中析出，成為不穩(wěn)定脂肪乳。

當(dāng)直徑大于5μm的乳滴占脂肪乳油相體積的百分比 (volume weighted percent of fat greater than five micrometers, PFAT5) 超過(guò)0.05%時(shí), 會(huì)影響脂肪乳的穩(wěn)定性, 臨床上產(chǎn)生有效性隱患和安全性風(fēng)險(xiǎn)，也就是說(shuō), 脂肪乳的 PFAT5 的值會(huì)直接影響脂肪乳的質(zhì)量。因此, 在尾部大顆粒控制中, 通常選擇5μm作為尾部大顆粒測(cè)定的閾值。

工作原理

乳狀注射液中5μm以上大乳粒的比例，可采用基于光阻（光消減）原理的單粒子光學(xué)傳感技術(shù)進(jìn)行測(cè)定。單個(gè)粒子通過(guò)狹窄的光感區(qū)時(shí)阻擋了一部分入射光，引起到達(dá)檢測(cè)器的入射光強(qiáng)度瞬間降低，強(qiáng)度信號(hào)的衰減幅度理論上與粒子橫截面（假設(shè)橫截面積小于光感區(qū)的寬度），即粒子直徑的平方成比例。用系列標(biāo)準(zhǔn)粒子建立粒徑與強(qiáng)度信號(hào)大小的校正曲線。儀器測(cè)得樣品中乳粒通過(guò)光感區(qū)產(chǎn)生的信號(hào)，根據(jù)校正曲線計(jì)算出乳粒的粒徑及加權(quán)體積。使用單粒子光學(xué)傳感技術(shù)傳感器時(shí)，需知道重合限與*佳流速。 

驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)（對(duì)儀器）

將儀器的閾值設(shè)為 1.8mm，上限為 50mm。分別測(cè)定5mm、10mm兩種規(guī)格的標(biāo)準(zhǔn)粒子，每一種標(biāo)準(zhǔn)粒子檢測(cè)三次，所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)粒子的平均數(shù)均粒徑的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于10％，與其標(biāo)示值的偏差應(yīng)小于10％。此外，所測(cè)得的每毫升標(biāo)準(zhǔn)粒子的數(shù)目應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)粒子標(biāo)示濃度的±10％以內(nèi)。

驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)（對(duì)乳液）

如果儀器配有自動(dòng)稀釋系統(tǒng)，直接用注射器或聚四氟乙烯管線將高濃度的樣品注入儀器中，由儀器自動(dòng)稀釋至適合的濃度再進(jìn)行檢測(cè)；如果儀器不具備自動(dòng)稀釋功能，則需手動(dòng)稀釋（第一次至少稀釋10倍），在預(yù)先經(jīng)0.2mm 孔徑過(guò)濾器過(guò)濾并經(jīng)超聲脫氣的水中加入適量乳狀注射液，緩慢攪拌得到輕微渾濁的均勻混懸液。無(wú)論哪種稀釋方式，最終粒子濃度均應(yīng)低于傳感器的重合限。將檢測(cè)器的閾值設(shè)為1.8mm，上限為50mm，測(cè)定樣品，每個(gè)樣品測(cè)定3次。按下式計(jì)算大于5mm的乳粒加權(quán)總體積占油相體積的百分比，其結(jié)果不得超過(guò)0.05%。

PSS Accusizer A7000 APS

PSS粒度儀公司隸屬美國(guó)Entegris公司，其品牌旗下的Accusizer系列APS型號(hào)設(shè)備是一款典型的光阻法原理的設(shè)備，采用SPOS單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)，通過(guò)對(duì)樣品進(jìn)行自動(dòng)稀釋，有效避免了人工操作導(dǎo)致的檢測(cè)誤差，集檢測(cè)、數(shù)據(jù)處理及自動(dòng)沖洗等功能一體，操作便捷、高效。

按照上述藥典要求，使用Accusizer A7000 APS光學(xué)粒度分析儀測(cè)試5mm和10mm的混合標(biāo)粒（批號(hào)：UH13A），連續(xù)測(cè)試3次，結(jié)果如下圖所示：

圖1：第一次測(cè)試

圖2：第二次測(cè)試

 圖3：第三次測(cè)試

圖4：標(biāo)粒證書(shū)

如上圖所示，5mm和10mm的粒徑測(cè)試結(jié)果與證書(shū)標(biāo)示值的偏差小于10%，且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差與所測(cè)粒子濃度也小于10%，符合中國(guó)藥典要求。

使用Accusizer A7000 APS測(cè)試乳狀注射液，結(jié)果如下圖所示：

圖5：乳劑測(cè)試結(jié)果

檢測(cè)過(guò)程中，儀器采用自動(dòng)化設(shè)計(jì)，報(bào)告模板按照藥典標(biāo)準(zhǔn)，可直接給出合格/失敗的判定，給用戶帶來(lái)極大的方便。

參考資料

中國(guó)藥典：光阻法測(cè)定乳狀注射液中大于5mm的乳粒